簡要描述:QIAGEN 試劑盒 exoEasy Maxi Kit從血漿、血清及細胞培養(yǎng)上清中純化外泌小體及其他細胞外囊泡(EV)可分離獲得完整的exosome及其他細胞外囊泡適用于功能性檢測及物理和生化分析
產品分類
Product Category詳細介紹
品牌 | 其他品牌 | 貨號 | 76064 |
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 主要用途 | 從血漿、血清及細胞培養(yǎng)上清中純化外泌小體及其他細胞外囊泡(EV) |
應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,食品,生物產業(yè),農業(yè) |
QIAGEN 試劑盒 exoEasy Maxi Kit
從血漿、血清及細胞培養(yǎng)上清中純化外泌小體及其他細胞外囊泡(EV)
可分離獲得完整的exosome及其他細胞外囊泡
適用于功能性檢測及物理和生化分析
可在25分鐘內純化獲得exosome及其他細胞外囊泡
可通過簡單的離心柱實驗方案平行處理多個樣品
可提取高達4 ml的血漿或血清,或者32 ml的細胞培養(yǎng)上清
exoEasy Maxi Kit使用了膜親和離心柱來高效地從血漿、血清、細胞培養(yǎng)上清及其他生物液體中提取獲得exosome及其他細胞外囊泡。Maxi規(guī)格的離心柱可允許處理大體積的樣品,包括高達4 ml的血漿或血清,或者32 ml的細胞培養(yǎng)上清。實驗流程非??焖僖恢拢浅_m用于提取EV進行exosome及其他細胞外囊泡的功能性分析。
Cat No./ID: 76064 exoEasy Maxi Kit (20) For 20 vesicle preps: 20 exoEasy Maxi Spin Columns, Collection Tubes (50 ml), Reagents and Buffers |
Cat No./ID: 76204 Buffer XBP (250 ml) 250 ml Binding Buffer |
exoEasy Maxi Kit適用于分子生物學應用。該產品不適用于疾病的診斷、預防或治療。
用于純化外泌小體及其他細胞外囊泡的exoEasy實驗方案不僅比超速離心更加快捷,而且可獲得更潔凈的純化產物。掃描電子顯微鏡顯示兩種技術均可提供完整的預期尺寸的囊泡,不過通過超速離心法制得的樣品中還含有一些并不符合EV尺寸或外形的更小的結構。
QIAGEN 試劑盒 exoEasy Maxi Kit
提取獲得的囊泡具有完整的功能,可用于多種下游應用,包括細胞培養(yǎng)等工作。洗脫的囊泡的性質和數(shù)量可通過多種不同的方法進行測定。其中包括電子顯微鏡、物理特征描述(例如,納米顆粒追蹤分析(NTA),或可調電阻脈沖感應(TRPS))、微粒分子成分分析(例如蛋白質、核酸或脂類)等。由于如NTA或TRPS等微粒計數(shù)方法無法將囊泡與其他懸浮顆粒區(qū)分開,使用未經處理的生物液體或仍含有其他顆粒物(例如,蛋白復合物)的粗制備樣品進行顆粒計數(shù)可能會明顯地高估囊泡數(shù)目。
Principle
exoEasy Kit在傳統(tǒng)的超速離心exosome或微泡提取方法的基礎上進行了改進,可在25分鐘內獲得純化的細胞外囊泡。
exoEasy Maxi Kit使用了膜親和結合步驟來從血漿、及血清或細胞培養(yǎng)上清中分離exosome及其他EV。這種方法無法通過大小或細胞來源對EV進行區(qū)分,也不依賴于是否存在微粒表位。它運用了囊泡的通用生化特性來提取樣品中的所有細胞外囊泡(參見圖片使用NTA對由exoEasy Maxi Kit提取獲得的細胞外囊泡進行性質分析)。因此,必須*去除細胞、細胞碎片、凋亡小體等組分,可在開始提取步驟前對樣品進行離心或過濾等操作。
Exosome Diagnostics, Inc.開發(fā)的技術使用了離心柱及專門的緩沖液來從預過濾的生物液體中純化exosome;可處理高達4 ml的血漿或血清。對于細胞培養(yǎng)上清,經試驗驗證可從高達32 ml的樣品中成功提取外泌小體(4次離心柱上樣步驟)。不過,上清中的囊泡濃度非常依賴于細胞類型及培養(yǎng)條件;因此我們建議,對于未經過該試劑盒測試樣品材料,起始上清體積不要超過16 ml。更高的樣品體積可能導致囊泡的回收率降低。實驗流程非??焖僖恢拢浅_m用于exosome及其他細胞外囊泡的功能性分析。除囊泡之外的懸浮顆粒絕大部分可在結合及清洗步驟中被去除,這種顆粒包括了大體積的蛋白復合物,其在血漿及血清中含量很高。
Procedure
提取細胞外囊泡的總流程僅需要25分鐘。將預先過濾過的血漿、血清或細胞培養(yǎng)上清(去除了尺寸大于0.8 μm的顆粒)與Buffer XBP進行混合并結合在exoEasy膜親和離心柱上。對結合的外泌小體使用Buffer XWP進行清洗,并隨后使用400 µl Buffer XE(主要含無機鹽的水緩沖液)進行洗脫,隨后即可用于物理或生化分析。對于特定應用,如生物檢測等,可能需要進行額外的濃縮或緩沖液置換步驟。此步驟可通過孔徑尺寸為100 kDa或更小的超濾方法來實現(xiàn)。
Applications
exoEasy Kit非常適合于從血漿、血清、細胞培養(yǎng)上清及其他生物液體中提取微囊泡。提取獲得的囊泡可用于如下應用進行分析:
•物理性質分析(例如,NTA,TRPS)
•電子顯微鏡
•提取并分析DNA、RNA*、蛋白質、脂類及其他成分
•流式細胞術
•抗體或熒光染料標記
•受體細胞的攝取
*如需提取囊泡RNA,我們推薦使用exoRNeasy試劑盒。
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